Szczepionka przeciwko onkoproteinom HPV-16 w neoplazji nabłonka żylaków cd

Do analizy histologicznej próbki przygotowano w formalinie i wybarwiono hematoksyliną i eozyną. Ocenę zmian dokonał jeden doświadczony patolog, zgodnie z kryteriami Instytutu Patologii Sił Zbrojnych, z consensusowym przeglądem dwóch patologów. Typowanie HPV wycinków zatopionych w parafinie wykonano za pomocą trzech ogólnych zestawów starterów HPV (CPI / II, MY 9/11 i GP5 + / 6 +), a następnie sekwencjonowanie i analizę za pomocą podstawowego lokalnego wyrównania Search Tool (BLAST) program Narodowego Centrum Informacji Biotechnologii. Produkt reakcji łańcuchowej polimerazy beta-globiny i ślepą próbę włączono jako kontrole 16-18 Wszystkie wyniki histologiczne i wirusologiczne zebrano w sposób zaślepiony w odniesieniu do wyników klinicznych. Bezpieczeństwo i tolerancja
Monitorowanie spontanicznych działań niepożądanych i reakcji w miejscu wstrzyknięcia, oceny kliniczne i testy laboratoryjne wykonywano po każdym szczepieniu, a następnie co 3 miesiące w sumie przez 24 miesiące obserwacji, jak opisano powyżej.14 Zdarzenia niepożądane zostały ocenione zgodnie z wersją 3.0 Wspólnych kryteriów terminologicznych dla zdarzeń niepożądanych (CTCAE), które oceniają zdarzenia w skali od do 5, z wyższymi ocenami wskazującymi na większą ostrość.
Immunologiczne monitorowanie odpowiedzi komórek T specyficznych wobec HPV-16
Jednojądrzaste komórki krwi obwodowej (PBMC) wyizolowano ze świeżych próbek heparynizowanej krwi za pomocą wirowania w gradiencie gęstości Ficoll, przy czym część komórek poddano natychmiast testom stymulacji limfocytów, a pozostałe komórki zamrożono. Odpowiedzi komórek T swoiste dla HPV-16 określono za pomocą wcześniej opisanego zestawu komplementarnych testów zgodnie ze standardowymi protokołami procedur operacyjnych z wcześniej zdefiniowanymi kryteriami odpowiedzi pozytywnych i wywołanych przez szczepionkę.15 Testy te zostały przeprowadzone przez wyszkolony personel ( patrz Dodatek Uzupełniający).
Analiza statystyczna
Odpowiedzi kliniczne są zgłaszane jako odsetek pacjentów z daną odpowiedzią i 95% przedział ufności. Wcześniejsze analizy wykorzystano do pomiaru odpowiedzi komórek T specyficznych dla HPV-16 (patrz Dodatek Dodatek). Wskaźnik odpowiedzi w wysokości 30% uznano za obiecujący. Ogółem przeprowadzono pięć analiz podgrup post hoc i przedstawiono je tutaj. Odpowiedź kliniczną po 24 miesiącach oceniano w zależności od wielkości zmiany na początku badania. W tej analizie pacjenci zostali podzieleni na dwie grupy (te, u których nie uzyskano odpowiedzi lub częściową odpowiedź po 12 miesiącach oraz te z całkowitą odpowiedzią po 12 miesiącach), a różnica między grupami w średniej wielkości zmiany w linii obliczono za pomocą poprawionego t-testu sparowanego Welcha. Siła różnych typów odpowiedzi immunologicznych i liczba różnych epitopów komórek T CD8 + zostały porównane między grupą bez odpowiedzi klinicznej a grupą z pełną odpowiedzią kliniczną 3 miesiące po ostatnim szczepieniu, z użyciem nieparametrycznego Manna. -Whitney test i oprogramowanie GraphPad InStat, wersja 3.00. Dla każdego typu testu immunologicznego siłę odpowiedzi immunologicznej bez odpowiedzi klinicznej, częściową odpowiedź kliniczną lub całkowitą odpowiedź kliniczną zdefiniowano operacyjnie jako kombinację wielkości i szerokości (tj. Liczbę różnych pul peptydów rozpoznawanych przez osobnika; komórki T pacjenta) odpowiedzi komórek T przez pobranie mediany liczby plamek swoistych dla HPV-16 (test immunoadsorpcyjny związany z enzymem interferonem-. [ELISPOT]), medianę wskaźnika stymulacji (test stymulacji limfocytów) lub medianę ilość wytwarzanego interferonu-. (cytometryczna tablica perełek) uzyskana dla wszystkich sześciu pul peptydów na pacjenta w grupie (np. mediana 6 pul peptydów × 5 pacjentów = 30 punktów danych w pełnej grupie odpowiedzi i 6 pulach peptydów × 8 pacjenci = 48 punktów danych w grupie bez odpowiedzi)
[hasła pokrewne: meble pracowniczne, hologramy els, usuwanie blizn potrądzikowych ]

Powiązane tematy z artykułem: hologramy els meble pracowniczne usuwanie blizn potrądzikowych